作者：李钦，广东省吴川市人民医院

HIV感染血清学筛查是医疗机构入院、术前、有创操作前的常规检测项目，第四代化学发光抗原抗体联合检测、酶联免疫吸附试验（ELISA、酶免）、胶体金快速检测是临床实验室最常用的三类筛查手段。

在日常检验工作中，多检测平台结果相悖是检验科常见疑难问题。当化学发光呈高值强阳性，而酶免、胶体金检测呈阴性时，极易引发结果误判，即将化学发光结果判定为仪器、试剂或体内干扰物质所致假阳性，从而直接报告酶免或胶体金阴性结果，造成急性早期感染漏诊，埋下公共卫生安全隐患。

依据《全国艾滋病检测技术规范（2025年修订版）》，分析急性感染期血清标志物变化规律：HIV核酸、p24抗原、抗体依次出现，核酸于感染1周即可检出，p24抗原约2周阳性，抗体需3周以上方可稳定检出。急性感染早期抗原浓度高而抗体尚未产生，易造成四代试剂阳性、三代抗体试剂阴性的情况，极易造成漏检。本文梳理结果不符时的处置流程，为疑难标本处置提供实操依据。

案例经过

患者男，66岁，因心血管系统疾病收入我院心血管内科，入院进行术前传染病常规筛查，患者自述有不洁接触史。

初筛出现极端矛盾结果

采用M平台第四代HIV抗原抗体联合检测试剂初筛，初次检测COI值 378.1，离心复测COI值 363.84，两次检测结果均为强阳性；ELISA酶免试剂、胶体金复测同一份标本，两项结果均为阴性。同一标本出现“化学发光高值强阳、酶免/胶体金全阴”的结果。

干扰因素排除试验

为排除体内干扰物质造成化学发光假阳性，检验科进行了干扰因素排查：血清总蛋白 59.5g/L，无高球蛋白血症；类风湿因子 RF检测结果处于参考区间，排除RF介导的交叉反应干扰；后续采用异嗜性抗体阻断剂（HBT）预处理标本复测，化学发光结果仍维持强阳性 381.37COI，基本排除异嗜性抗体、自身抗体、高球蛋白等内源性干扰因素。

多平台交叉复核与抗原抗体组分拆分试验

检验科更换两种化学发光平台进行验证：R平台检测COI值 501.1、A平台检测S/CO值 484.78，两个平台第四代试剂均呈极高阳性信号，排除单台仪器、单批次试剂系统误差。

进一步在M平台上开展抗原、抗体组分拆分试验，M平台抗原检测COI值为352.5，抗体检测COI值为0.09，HIV特异性抗体阴性，锁定本病例为p24抗原主导的急性早期感染。

R平台检测结果

长期动态随访血清学转换过程

检验科收到阳性结果当天，按照流程立即上报疾控，两周后疾控中心回报结果为阴性；三周后患者来本院复查：化学发光COI值降至10.94，胶体金转为强阳性，酶免试剂出现弱阳性反应，再次报送CDC，CDC回报结果为HIV抗体不确定，需继续回访；一个月后，CDC回报结果为阳性。

案例分析

可明确判定为HIV真阳性的核心证据

结合全流程检测数据、干扰排查、多平台验证与动态随访，可排除初筛结果假阳性，确诊早期感染，核心依据分为四点： 

第一、多品牌第四代化学发光试剂均检出极高阳性信号，不存在单一设备、试剂偶发误差；

第二、经HBT阻断、RF、高球蛋白血症等干扰因素排查，未发现可造成假阳性的内源性干扰；

第三、抗原抗体拆分试验直接证实p24抗原阳性、抗体阴性，符合急性感染窗口期标志物特征；

第四、间隔一个月动态随访，抗体由完全阴性逐步转为弱阳性，符合HIV感染病程。

抗原主导窗口期致酶免“漏检”核心机制

本案例中，酶免、胶体金的初筛试验阴性并非检测失效，而是检测方法学局限性。

传统第三代ELISA酶免、胶体金检测试剂以及CDC使用的免疫印迹确诊试验（WB试验）仅针对HIV特异性 IgM、IgG抗体进行捕获检测，不包含p24抗原识别位点，感染极早期机体尚未合成足量可检出抗体，因此回报阴性。而第四代化学发光试剂为p24抗原与HIV特异性抗体联合检测，且光信号检测灵敏度远高于酶免显色法，可捕捉p24抗原，即便抗体浓度极低仍可检出阳性。

相较于第三代试剂仅包被了HIV-1/2型抗原，因而仅能检测HIV-1/2型抗体，第四代酶免及胶体金试剂包被了HIV-1/2型抗原+HIV1型的p24抗体。根据《全国艾滋病检测技术规范（2025年修订版）》，作为不区分抗原抗体检测试剂的筛查和复查试剂，应同时具备抗原抗体的检测能力。

《全国艾滋病检测技术规范（2025年修订版）》筛查流程

CDC使用的WB免疫印迹试验，其原理是电泳分离HIV全病毒裂解蛋白，只能判读成熟高亲和力的IgG抗体，几乎不识别早期低亲和力的IgM抗体[2]。

根据《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断(WS 293-2019)》，HIV-1抗体阳性需要：1. 至少有2条env带（gp41和gp160/gp120）出现，或至少1条env带和p24带同时出现；2. 符合试剂盒提供的阳性判定标准。如果同时呈HIV-1抗体不确定或阴性反应，需用HIV-2型确证试剂再做HIV-2的抗体确证试验，HIV-2型阳性判断需要同时符合以下二条标准：1. 出现至少2条env带（gp36和gp140/ gp105）；2. 试剂盒提供的阳性判定标准[3]。

而在感染早期，仅有少量的IgM，不足以形成多条清晰的IgG条带，因此会回报“阴性/抗体不确定”。需要等约4周IgG大量生成后，才能满足确证阳性条带标准。

随访过程化学发光信号值下降原理

入院初筛，化学发光COI值大于360；随访20余天后，降至10.94，检测信号显著回落，核心原因为免疫复合物形成。

随感染时间延长，机体免疫系统持续合成p24特异性抗体，外周血游离p24抗原与抗体特异性结合，形成稳定抗原 - 抗体复合物；由于复合物中p24抗原表位遮蔽，可被试剂捕获的游离抗原浓度大幅降低，化学发光检测信号随之下降[4]。

需要指出的是，COI值下降并不意味着病情改善或病毒复制水平降低，而是反映了宿主免疫应答逐步建立及感染由急性抗原血症阶段向血清学转换阶段过渡的过程。

HIV窗口期确诊的必要性

何为“窗口期”？是指从人体感染HIV病毒开始到能检测出HIV感染的这段时间。

病毒侵入机体早期，宿主特异性体液免疫应答尚未建立，免疫防御体系未形成有效抗病毒屏障；HIV持续侵袭并裂解CD4⁺、CD8⁺T 淋巴细胞，外周血病毒复制水平急剧攀升。《急性HIV感染诊疗管理专家共识（2025版）》提到，大量研究表明急性HIV感染者通常病毒载量较高，达5-7 log10拷贝/mL，模型分析表明急性期的性传播风险约为慢性感染期的43倍，且急性期感染者中传播性耐药突变检出率高[5]。因此，避免窗口期漏检极为重要。

《全国艾滋病检测技术规范（2025年修订版）》明确了“筛查→复检→确证”三步走，新增了抗体确证检测结果为不确定时应进行核酸检测，以尽快确认HIV感染状态。同时也提到随访三个月后，若核酸检测和抗体确证均为阴性，原则上才可考虑排除HIV感染[6]。

《人类免疫缺陷病毒感染检测与诊断管理的专家共识（2025版）》提到，对于区分抗原抗体检测试剂反应模式为抗原阳性的患者，推荐直接采用HIV RNA或DNA作为补充试验，可将急性HIV感染者筛查到确证耗时的中位数大幅减小至3.5天，缩短了窗口期并解决WB补充试验不确定结果较多的问题[7]。

权威指南共识一致提出，对抗体确证不确定、仅抗原阳性的急性期标本优先开展核酸检测，旨在加快急性HIV感染窗口期的确诊。

总结

在第四代高灵敏抗原抗体联合检测普及的当下，多平台检测结果不一致的情况不再等同于仪器或试剂故障，而是感染早期特殊血清学状态的信号。

临床检验工作者需跳出单一方法学的判断局限，熟练掌握HIV感染标志物的时序演变规律，严格遵循国家艾滋病检测规范，落实异常标本复核、干扰排查、动态随访全流程；临床医师需同步更新检测认知，结合患者流行病学史、临床症状综合判读检验报告，避免造成急性HIV感染漏诊。

检验与临床双向联动、多方法学协同验证、标准化异常样本处置流程，才能最大程度提高HIV检出能力，降低漏诊带来的医患安全与公共卫生风险。

【参考文献】

[1] Pragna, P. (2012, January 22). Rapid HIV screening: Missed opportunities for HIV diagnosis and prevention. Journal of clinicalvirology.

[2] Saag MS. N Engl J Med. HIV Infection - Screening, Diagnosis, and Treatment.2021, 384:2131-2143.

[3] 艾滋病和艾滋病病毒感染诊断(WS 293-2019)

[4] 赫晓霞,蒋岩,邢文革.《艾滋病自我检测指导手册(第一版)》简介[J].中国艾滋病性病, 2020, 26(6):653-655.

[5] 急性HIV感染诊疗管理专家共识（2025版）

[6] 全国艾滋病检测技术规范（2025年修订版）

[7] 人类免疫缺陷病毒感染检测与诊断管理的专家共识（2025版）

来源:检验医学网