作者：姚树斌，王心刚，鹤岗市人民医院检验科

前言

日常检验科上机检测中，常会遇到一类特别费解的故障：血清样本肉眼清亮无凝块、样本量充足、离心状态正常，唯独叶酸（Folate）项目上机后仪器持续报警：样本有凝块，或者样本余量不足。

多数时候第一反应会怀疑采样针故障、管路堵塞或仪器硬件问题，科室随即联系厂家技术支持协助排查。但本次案例排查结论颠覆常规认知：并非仪器故障、也无真实样本凝块，根本原因是血清中单克隆异常M蛋白，与叶酸检测试剂强碱预处理组分发生构象改变与分子聚集，形成肉眼不可见微量凝胶絮状物，造成采样针微堵、吸样流量与液面传感异常，仪器误判触发假性凝块及样本余量不足报警。

本文结合真实案例，剖析干扰发生机制，梳理鉴别思路、处置方案及行业依据，供临床检验同行参考。

一、案例现场与仪器报警

【报警原文】样本有凝块，或者样本余量不足

现场排查情况：

1、样本肉眼观察：无纤维丝、无肉眼凝块、血清分层清亮；

2、样本加样体积充足，远超仪器最低吸样量要求；

3、同批次其他生化、免疫项目均可正常上机检测，仅叶酸项目特异性反复报警；

4、初步排查采样针、样本架、管路液位检测均无硬件异常，排除仪器本身故障。

进一步调取该患者生化全套结果，锁定核心异常：总蛋白显著升高、球蛋白重度增高、白球比倒置严重，高度提示M蛋白血症可能。

报告可见：患者总蛋白、球蛋白重度升高，白球比显著倒置，符合单克隆M蛋白血症实验室特征，为干扰溯源提供关键依据。

二、干扰机制：异常蛋白+试剂强碱=隐形凝胶堵针

翻阅原厂叶酸试剂盒说明书可见：叶酸检测前期预处理体系含有高浓度强碱成分，作用是解离血清中结合态叶酸，保证检测反应效率。

【作用原理】

❖血清中单克隆异常M蛋白在强碱性试剂环境中，会发生蛋白空间结构变性、分子交联聚集，形成肉眼不可见的微凝胶絮状物；

❖凝胶物质极易附着采样针内壁、堵塞针孔及微小流路，造成吸样阻力变大、吸样量不稳定；

❖微凝胶造成吸样阻力增大、瞬时流量不稳、液面探测信号跳变；仪器液位传感、吸样压力校验异常，间接触发「样本有凝块/样本余量不足」假性报警。

三、异常蛋白引发干扰的临床参考判定

结合公开共识文献与临床病例研究综合分析：

1、血清M蛋白是免疫检测常见内源性干扰物，对需强碱预处理、pH变化大的检测项目，易引发取样波动、液面识别异常、假性凝块报警；

2、当总蛋白、球蛋白重度升高、白球比明显倒置时，M蛋白分子聚集风险显著增加，易造成采样针微堵，干扰叶酸项目正常检测流程；

3、国内外临床病例已证实：M蛋白血症样本在化学发光法叶酸检测中，仪器异常报警发生率显著升高，同时可干扰结果准确性；

本例患者蛋白谱特征与文献报道M蛋白干扰特征高度吻合，可明确为异常M蛋白隐性干扰导致假性报警。

四、样本稀释处置方案及权威依据

参照现有行业标准、操作规程及临床共识，针对M蛋白带来的检测干扰可采用样本稀释方式进行预处理复测。

【参考依据】

（1）《免疫学检测的干扰因素和处理策略专家共识》提出：针对M蛋白带来的检测干扰，可采用稀释方式降低干扰影响；

（2）《全国临床检验操作规程》第4版规范：存在高蛋白基质干扰的血清样本，可采用稀释后复测；

（3）WS/T416-2013《临床干扰实验指南》明确：对于内源性物质引发的检测干扰，稀释预处理是常用且有效的消除手段。

【本案例处置过程】采用叶酸项目配套C0校准品，按1:1比例对患者血清进行等体积稀释后上机检测并出具校正后结果，叶酸检测值为14nmol/L，参考范围＞7.23nmol/L，结果处于正常区间。稀释复测过程中仪器未再出现凝块、样本余量不足相关报警，有效消除了异常M蛋白隐性干扰，结果可满足临床诊断参考标准。

五、检验科实战总结建议

1、叶酸项目出现凝块、样本余量不足报警时，先直观核查样本状态与存量，排除真实凝块后，优先查看球蛋白、总蛋白相关指标；

2、检出蛋白指标明显异常的样本，提前预判强碱预处理类检测项目的干扰风险，无需盲目报修仪器设备；

3、遭遇异常蛋白引发的假性堵针报警，可采用本项目C0校准品进行稀释复测，操作简便且干扰消除效果稳定；

4、日常工作中熟悉各类检测项目试剂组分与反应原理，结合文献共识判断异常原因，可高效排查疑难报警故障。

专家点评

高波 鹤岗市人民医院主任

本次案例是检验科日常工作中极具代表性的疑难报警处置实例，一线检验人员没有局限于“仪器故障、样本凝块”的常规思维，而是结合患者检验数据、试剂反应原理及行业文献层层溯源，最终明确单克隆M蛋白受叶酸试剂强碱体系影响形成微量凝胶絮状物，进而引发假性报警这一核心原因，排查思路清晰、分析论证严谨，论据充分。

文中梳理的鉴别流程、稀释处置方案，符合临床检验相关规范要求，针对高蛋白、M蛋白血症标本的干扰问题给出了切实可行的解决办法。该案例总结的经验，可为广大检验工作者处理同类异常报警、识别内源性蛋白干扰提供重要参考。

【参考文献】

[1] 国家卫生健康委员会.WS/T 416-2013 临床干扰实验指南 [S].2013.

[2] 尚红，王毓三，申子瑜。全国临床检验操作规程 [M]. 第 4 版。北京：人民卫生出版社，2015.

[3] 北京医学会检验医学分会，上海市医学会检验医学分会。免疫学检测的干扰因素和处理策略专家共识 [J]. 检验医学，2024,39 (12):1131-1139.

[4] 王依凡，张明芳，赵楠楠，等.1 例多发性骨髓瘤患者叶酸检测结果异常的干扰因素分析 [J]. 实用检验医师杂志，2021,13 (1):56-57.

[5] 化学发光法叶酸检测试剂盒说明书.

来源：检验医学网