作者：陈林利  王海，贵州航天医院

我们都知道“没有绝对完美的检测”。免疫检测（如化学发光、酶联免疫法）虽然灵敏度极高，但同时也容易“看花眼”——这就是免疫检测中常见的干扰现象。

事实上，假阳性结果在临床免疫检测中并不罕见。类风湿因子、嗜异性抗体、自身抗体，甚至妊娠期生理变化，都可能导致检测信号异常，结果出现假阳性。据相关文献报道，某些免疫检测项目的假阳性率可达0.5%-1%以上，在特殊人群（如孕产妇、自身免疫病患者）中更高。下面这位35岁孕妇的真实经历，就是一次典型的“干扰乌龙”。

案例经过

孕妇，35岁，日常孕检，于10月4日就诊于外院；否认糖尿病病史，否认肝炎、结核、疟疾等传染病史，否认外伤史及药物、食物过敏史。进行传染病筛查，检测结果为HIV Ab/Ag 158.77 S/CO 、Anti-TP 阴性、Anti-HCV 阴性。

外院用其生化标本进行复测，复查结果为HIV 267.638 S/CO,结果一致，排除样本检测错误的问题。

孕妇对结果存在疑问，外院将样本送至我科进行复查，结果<0.08 阴性。

10月11-14日，CDC返回确诊结果：HIV-1抗体不确定、HIV RNA未检出。

根据CDC确认，该孕妇HIV未感染，初筛结果假阳性，究竟是什么原因导致这种阴阳不符的结果？

案例讨论

同一人的血液样本在两个检测平台出现阴阳性差异，并非仅是仪器故障导致，更反映了免疫检测中的本质性难题——样本检测易受多种干扰因素影响，检测平台之间抗干扰性能不一致，从而导致结果存在差异。

该孕妇生理改变导致其机体产生了一些结构类似HIV抗体的“交叉反应物质”，使得试剂产生反应出现一个“假信号”，导致检测结果假阳性，这种情况在日常检测工作中很常见。

知识拓展

2024年发布的《免疫学检测的干扰因素和处理策略专家共识》明确指出，免疫学检测存在诸多干扰因素，分为内源性干扰因素和外源性干扰因素，贯穿分析前、中、后各环节。这些干扰因素的干扰作用可分为两类：一是改变样本中待测物的浓度，进而干扰检测结果；二是通过干扰抗原与抗体之间的结合过程，对检测结果造成影响。

内源性干扰因素

类风湿因子

类风湿因子属于自身抗体，靶抗原是变性免疫球蛋白G的Fc片段，可结合二抗和捕获抗体的Fc段，尤其是在采用捕获法测定IgM抗体时，类风湿因子与Ig发生聚集，导致假阳性结果。

然而，当类风湿因子只与信号抗体或捕获抗体结合时，会形成空间位阻，阻碍捕获抗体-抗原-信号抗体复合物的形成，使检测信号变弱，引起假阴性结果。

嗜异性抗体

嗜异性抗体是人体产生的能与其他动物Ig结合的抗体，通过结合IgG的Fc段来结合检测系统的标记抗体或捕获抗体，引起假阳性或假阴性结果。

自身抗体

自身抗体的靶抗原是自身成分，大部分为IgG型，主要对自身抗原的免疫学检测产生干扰。

补体

急性炎症、组织损伤、风湿免疫病等均会导致血清补体升高，ELISA检测系统的酶结合物也可诱导补体活化。此外，抗体结构的变化可促进补体1q与Ig Fc片段结合，从而出现假阳性结果。另外，活化的补体可与固相抗体结合，抑制抗体和抗原的特异性反应，导致假阴性结果。

其他内源性干扰因素还有激素结合蛋白、脂血、黄疸、交叉反应物质等。

外源性干扰因素

生物素

生物素是一种水溶性B族维生素，在标记反应时，生物素与抗原或抗体结合一般不影响后者活性，但生物素与被标记物之间可能存在空间位阻，从而干扰免疫学检测结果。

溶血

除体内溶血原因外，采样不当、低渗溶液、机械性强力振荡、突然冷冻（-20至-25℃）或解冻等均可引起标本溶血，标本溶血导致的血红蛋白释放会对免疫学检测结果产生正向或负向干扰。

纤维蛋白

在没有促凝剂和抗凝剂存在的情况下，正常血液标本会在采集2h后完全凝固。在临床检验工作中，对未充分凝固的血液进行离心会导致纤维蛋白原残留，形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果。

其他外源性干扰因素还有仪器、试剂、人工操作等内容。

面对上述干扰因素，临床实验室并非束手无策。“干扰试验”正是帮助检验人员识别并排除干扰的系统性方法。《免疫学检测的干扰因素和处理策略专家共识》推荐了多种识别和处理手段，主要包括：

常见的识别方法

1. 使用具有不同结合位点的其他检测方法或选用来自不同物种的抗体进行复测。通过比较两种方法的结果来判断是否存在干扰。

2. 采用不同的检测系统进行重测，比较结果差异，但需注意不同平台之间本身存在的检测差异。

3. 使用动物血清或专用稀释液对样本进行梯度稀释，待测物浓度的变化不成比例则表明可能存在干扰物。

识别自身抗体或嗜异性抗体

用多个物种来源或不同浓度的阻断剂处理样本后再进行检测。通过比较阻断前后的结果来判断是否存在嗜异性抗体或人抗动物抗体的干扰，需注意阻断剂本身可能对待测物产生影响。

大分子干扰物质的识别

混合法

鉴别巨分子促甲状腺激素等大分子干扰物时，可采用混合法，将此类患者标本与已知甲状腺功能减退患者的标本以1:1比例混合，孵育4h。甲减患者的TSH回收率为85%-97%，则提示存在巨分子TSH干扰。

沉淀回收试验

将180μL标本和180μL 25%PEG 6000溶液以1:1比例混匀，旋转振荡10s，1500-10000g离心5min，计算回收率。回收率（%）=（2×标本处理后的检测浓度/标本处理前的检测浓度）×100%，回收率<40%则说明存在大分子蛋白干扰。

Protein A/G处理

先用1mLpH值为8.0的结合缓冲液（0.05mol·L-1硼酸钠，0.15 mol·L-1NaCl）洗涤Protein A/G，16000g离心10min，去除上清，加入30 μL患者或对照血浆，室温条件下以250r·min-1振荡1h，16000g离心10min后检测上清，计算目的分子的回收率。

用Protein A/G处理样本后进行回收试验，如果患者样本的回收率低于对照样本，则表明可能存在大分子复合物干扰。回收率（%）=标本处理后上清中目的分子浓度/标本处理前的原始结果×100%。

凝胶过滤层析法

阴性测试并不能排除干扰，而阳性结果则表明可能存在干扰。

由于各个厂家存在抗干扰性能的差异，存在一定概率的假阳性结果，科室对于阳性结果的复核至关重要。根据《全国艾滋病检测技术规范（2025年修订版）》第四章“HIV感染检测流程”中关于“筛查检测流程”的规定，艾滋病检测实验室的筛查流程应严格按照以下标准化操作执行：

HIV不区分抗原抗体检测试验进行筛查检测流程

HIV区分抗原抗体检测试验进行筛查检测流程

HIV抗体检测试验进行筛查检测流程

总结

假阳性的本质在于免疫检测系统的分析特异性受限

内源性干扰因素（包括类风湿因子、嗜异性抗体、自身抗体、补体等）与外源性干扰因素（如生物素、溶血、纤维蛋白析出等）均可通过非特异性桥接、空间位阻或信号干扰等机制，导致检测结果偏离真实状态。

本例孕产妇作为特殊生理人群，其体内免疫状态发生适应性改变，易产生与HIV抗原结构相似的交叉反应物质，是假阳性的高风险人群。

实验室应建立系统的干扰识别与处置技术路线

多平台比对、梯度稀释试验、嗜异性抗体阻断试验、PEG沉淀回收试验及凝胶过滤层析法等技术手段，是识别和验证干扰存在的有效工具。当同一标本在不同检测平台或方法学上呈现结果不一致时，应高度怀疑干扰因素的存在，并立即启动补充试验——优先推荐HIV核酸检测，以缩短诊断窗口期、避免非特异性反应的持续干扰。

标准化的检测流程是防范误诊的制度性保障

依据《全国艾滋病检测技术规范（2025年修订版）》第四章规定，HIV筛查有反应样本严禁直接出具阳性报告，必须依次完成复检（双孔/双份）和补充试验（核酸试验或抗体确证试验）两个确认环节。本案例正是通过跨平台复核与最终核酸检测的有机结合，实现了假阳性的准确识别与排除。

综上，免疫检测干扰是检验医学领域固有且不可完全避免的技术挑战，但通过科学、系统的干扰识别策略与规范化的两级检测流程，绝大多数假阳性结果均可被有效化解。

检验人员应持续提升对各类干扰因素及干扰机制的认识，熟练掌握识别与验证技术，严格执行标准化操作流程；临床医生亦应充分理解“筛查阳性不等于感染”，为实验室完成补充试验预留合理时间窗口。检验与临床的紧密协作，是保障检测结果准确性与患者医疗安全的根本前提。

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来源：检验医学网