作者：崔碧云，广东省龙川县人民医院

案例经过

近期在审核检验报告过程中，我院一名职工体检标本丙肝抗体结果为阳性，采用化学发光法检测数值 9.15AU/mL；标本离心后重新上机复测，数值为 6.84AU/mL，同步使用胶体金试纸条复检，结果仍为阳性，上述结果高度提示存在丙型肝炎感染可能。

调取该职工既往体检档案，其 2023 年度体检丙肝抗体结果为阴性。为明确是否为近期新发感染，安排该职工重新采集标本加测丙肝病毒核酸（HCV-RNA）。但后续检测结果出现疑点：丙肝病毒核酸初检回报 “不确定”，重复复测后结果仍无变化。

化学发光法和胶体金法（金标法）检测的均为丙肝抗体，前者可定量、灵敏度高，多用于筛查；后者操作快捷简便，适合即时检验。二者原理均依托抗原与抗体特异性结合。目前主流化学发光法多采用双抗原夹心法，但若血清内存在类风湿因子或异嗜性抗体，会模拟丙肝抗体形成假阳性结合通路，产生异常检测信号。胶体金法同样易受此类干扰物质影响，因此两种方法同时检出阳性，不一定代表真实丙肝感染，更像是干扰物质共同造成的假阳性结果。该类干扰常见于自身免疫病、高球蛋白血症等人群。遇到此种情况，需依靠丙肝病毒 RNA 核酸检测进一步确诊。

但本次出现特殊情况，作为确诊金标准的核酸检测结果也无法明确。PCR 检测人员反馈，该标本丙肝病毒 RNA 核酸检测结果为 “不确定”。

RNA为何“不确定”？干扰物在作祟

丙肝RNA检测是确诊现症感染的“金标准”，但它极度依赖精密酶反应。血清中的PCR抑制物——如残留的血红素、肝素，或高浓度免疫球蛋白复合物，会抑制DNA聚合酶活性，使扩增曲线畸形翘尾、荧光信号异常，仪器无法准确给出“阳性”或“阴性”，只能判为“不确定”。不同检测人员两次检测均如此，则排除了人员操作污染带来的困扰。说明干扰物顽固存在。

聚乙二醇沉淀：一招拨开迷雾

为排查干扰因素，检验人员采用聚乙二醇 - 6000（PEG-6000）沉淀法处理标本：取 300μl 血清，加入等体积 300μl 20% PEG 溶液，充分混匀后室温静置 5min，3500 转 /min 离心 5min，吸取上清液上机检测 HCV 抗体。

同步设置对照组：取 300μl 血清，加入等体积 300μl 生理盐水，混匀后室温放置 5min，3500 转 /min 离心 5min，取上清同步检测。

经 PEG 沉淀去除干扰蛋白后的上清复测 HCV 抗体，结果差异显著：PEG 处理组 HCV 发光值仅 0.05，对照组数值为 6.05，判定为阴性。

该结果证实初次阳性结果完全由内源性干扰物造成。若机体真实存在丙肝感染，即便经 PEG 沉淀处理，上清液仍可检出 HCV 相关标志物；本次处理后指标降至阴性，足以证明标本内并无丙肝特异性抗体，初次抗体阳性为干扰导致的假阳性。

聚乙二醇沉淀：真阳性会不会变假阴性？

聚乙二醇（PEG）确实会沉淀部分正常蛋白，但在推荐条件下，能选择性去除干扰性大分子。低浓度下主要沉淀免疫复合物、大分子IgM聚集物、以及与类风湿因子等大分子干扰物。这些正是干扰抗体及核酸检测的“元凶”。

本案例的操作是“用PEG-6000沉淀5分钟后高速离心取上清”，短时间孵育。这是一种经典的循环免疫复合物沉淀法。所以，它会带走正常蛋白中的大分子复合物部分，但保留绝大部分游离的、单体形态的清蛋白和球蛋白，对后续检测无致命影响。

所以PEG沉淀法之所以能成为免疫复合物干扰下的关键鉴别工具，正是基于这一特性：

如果沉淀后检测转阴 → 原始信号大概率源于可被PEG去除的干扰物，体内无现症感染。

如果沉淀后仍为阳性 → 提示存在不能被PEG去除的真病毒，支持现症感染。

因此，后续若再遇到抗体检测灵敏度高但特异性不足、本应精准的核酸检测结果却模棱两可、无法明确诊断的病例，检验人员可采用该方法排除内源性干扰，协助临床规避误诊及不当治疗。

来源：检验医学网